Métodos experimentales en el pez cebra (Danio rerio) para la caracterización de genes humanos relacionados con trastornos del neurodesarrollo

Abstract

Los trastornos del neurodesarrollo son un grupo de trastornos que se manifiestan en períodos tempranos del desarrollo. Entre ellos se encuentran la discapacidad intelectual y los trastornos del espectro autista, que se solapan con gran frecuencia y en cuya etiología influyen factores genéticos y ambientales. Los análisis realizados para descubrir genes involucrados en la discapacidad intelectual han señalado la implicación de TRIP12, el cual también puede provocar autismo. Para investigar la implicación de TRIP12 en este tipo de trastornos, se realizó un bloqueo transitorio del gen mediante morfolinos en pez cebra, analizando el fenotipo morfológico resultante y la locomoción, y se realizó una validación de genes housekeeping así como del bloqueo transitorio a través de análisis de expresión génica por qPCR. Asimismo, se caracterizaron genotípica y fenotípicamente individuos de una línea mutante en pez cebra de trip12 generada mediante el sistema CRISPR/Cas9. Los resultados del análisis fenotípico de los individuos con bloqueo transitorio del gen revelan diferencias significativas (p < 0,05) en la longitud del cuerpo, el diámetro de la cabeza, la distancia del otolito al ojo y el área del ojo, siendo todas las medidas menores en individuos wild type. En relación al análisis fenotípico de los individuos mutantes, existe un aumento estadísticamente significativo respecto a los individuos wild type en todas las medidas (p < 0,05), a excepción del diámetro de la cabeza, que no presenta diferencias en ningún grupo. En cuanto al análisis de locomoción, se detectaron diferencias significativas (p < 0,05), presentando los individuos morfantes un menor movimiento que los wild type tanto en condiciones de luz como de oscuridad.