Afectación hepática en ratones deficientes en seipina. Bases moleculares y caracterización anatomopatológica

Abstract

Introducción y objetivos: La lipodistrofia congénita generalizada tipo 2 es una enfermedad rara de herencia autosómica recesiva caracterizada por ausencia casi total de tejido adiposo. Se asocia a alteraciones metabólicas y a afectación hepática de instauración temprana, que condicionan un pronóstico pobre. Variaciones de diversa índole de la seipina, proteína codificada por el gen BSCL2, parecen ser las responsables de sus manifestaciones. En este trabajo, se exploran las consecuencias anatomopatológicas y moleculares del déficit de seipina a nivel hepático mediante un modelo murino de la enfermedad para tratar de establecer las relaciones pertinentes entre genotipo, grado de afectación hepática y expresión de la citoquina Fgf21. Animales y métodos: Estudio experimental de las consecuencias morfométricas, anatomopatológicas y moleculares a nivel hepático de la disrupción ubicua de la seipina en ratones transgénicos generados mediante tecnología Cre-loxP. Se han establecido tres cohortes de ratones: homocigotos Bscl2-/-, heterocigotos Bscl2+/- y controles wild-type Bscl2+/+, y se han practicado necropsias entre 1 y 24 meses de edad. Se han descrito las características macroscópicas e histopatológicas del hígado, evaluado el grado de esteatohepatitis por medio del sistema de la NASH CRN y analizado la expresión de Fgf21. Resultados: Los ratones knockout de seipina presentaron lipoatrofia generalizada y hepatomegalia, siendo el peso del hígado mayor que el de los wild-type. Desarrollaron esteatosis hepática mixta de predominio macrovesicular y de inicio temprano, con evolución a esteatohepatitis y fibrosis pericelular ligera. Además, la expresión de Fgf21 resultó ser significativamente mayor que en los controles. Conclusiones: La inactivación del gen Bscl2 en ratones induce el desarrollo de lipodistrofia generalizada con enfermedad hepática grasa no alcohólica (esteatosis, esteatohepatitis y fibrosis). Además, la desregulación al alza de la expresión de Fgf21 correlaciona con un mayor grado de afectación hepática.Introdución e obxectivos: A lipodistrofia conxénita xeneralizada tipo 2 é unha enfermidade rara de herdanza autosómica recesiva caracterizada por ausencia case total de tecido adiposo. Asóciase a alteracións metabólicas e a afectación hepática de instauración temperá, que condicionan un prognóstico pobre. Variacións de diversa índole da seipina, proteína codificada polo xen BSCL2, parecen ser as responsables das súas manifestacións. Neste traballo, explóranse as consecuencias anatomopatolóxicas e moleculares do déficit de seipina a nivel hepático mediante un modelo murino da enfermidade para tratar de establecer as relacións pertinentes entre xenotipo, grao de afectación hepática e expresión da citocina Fgf21. Animais e métodos: Estudio experimental das consecuencias morfométricas, anatomopatolóxicas e moleculares a nivel hepático da disrupción ubicua da seipina en ratos transxénicos xerados mediante tecnoloxía Cre-loxP. Establecéronse tres cohortes de ratos: homocigotos Bscl2-/-, heterocigotos Bscl2+/- e controis wild-type Bscl2+/+, e practicáronse necropsias entre 1 e 24 meses de idade. Describíronse as características macroscópicas e histopatolóxicas do fígado, avaliouse o grao de esteatohepatite por medio do sistema da NASH CRN e analizouse a expresión de Fgf21. Resultados: Os ratos knockout de seipina presentaron lipoatrofia xeneralizada e hepatomegalia, sendo o peso do fígado maior ca o dos wild-type. Desenvolveron esteatose hepática mixta de predominio macrovesicular e de inicio temperán, con evolución a esteatohepatite e fibrose pericelular leve. Ademais, a expresión de Fgf21 resultou ser significativamente maior ca nos controis. Conclusións: A inactivación do xen Bscl2 en ratos induce o desenvolvemento de lipodistrofia xeneralizada con enfermidade hepática graxa non alcohólica (esteatose, esteatohepatite e fibrose). Ademais, a desregulación á alza da expresión de Fgf21 correlaciona cun maior grao de afectación hepática.Introduction and objectives. Type 2 congenital generalised lipodystrophy is a rare autosomic recessive disorder characterized by a nearly complete lack of adipose tissue. It is associated to early-onset metabolic abnormalities and liver disease, which determine a poor prognosis. Different variations of seipin, a protein encoded by the gene BSCL2, seem to be responsible for its features. In this study, the histological and molecular consequences of seipin deficiency are explored through a murine model of the disease in order to establish relations between genotype, liver involvement, and expression of the cytokine Fgf21. Animals and methods. Experimental study of the morphometric, histological, and molecular consequences of seipin ubiquitous disruption in the liver of transgenic mice created with CreloxP technology. Three cohorts of mice were established: homozygous Bscl2-/-, heterozygous Bscl2+/-, and wild type Bscl2+/+, and necropsies were performed at ages of 1 to 24 months. Macroscopic and histological features were described, the level of steatohepatitis was rated using the NASH CRN scoring system, and Fgf21 expression was analyzed. Results. Seipin knockout mice showed generalised lipoatrophy and hepatomegaly. Liver weight was greater than that of wild types. They developed early-onset, mainly macrovesicular, mixed liver steatosis, with progression towards steatohepatitis and mild pericellular fibrosis. Furthermore, Fgf21 expression turned out to be significantly higher than in controls. Conclusions. Bscl2 gene knockdown in mice induces the development of generalised lipodystrophy associated to non-alcoholic fatty liver disease (steatosis, steatohepatitis, and fibrosis). Moreover, up-regulation of Fgf21 expression correlates to greater liver damage.