Detección de micoplasmas hemotrópicos en perros con sospecha de hemopatógenos de Galicia: factores de riesgo y efecto en el hematocrito

Abstract

[ESP] Los micoplasmas hemotrópicos (hemoplasmas) son bacterias epicelulares obligadas que infectan los glóbulos rojos de una amplia variedad de mamíferos, pudiendo causar anemia hemolítica de gravedad variable. En el perro se describen dos especies: Mycoplasma haemocanis y “Candidatus Mycoplasma haematoparvum”. En ellos, la infección suele tener un curso crónico asintomático, pero la esplenectomía y la inmunosupresión favorecen el desarrollo de una infección aguda manifiesta. Los objetivos de este trabajo fueron determinar la presencia de micoplasmas hemotrópicos en perros con sospecha clínica de infección por hemopatógenos, identificar las especies detectadas molecularmente y determinar si ciertos factores influyen en la presencia de estos patógenos. Además, se evaluó el efecto de los micoplasmas hemotrópicos sobre el valor del hematocrito en infecciones únicas y en coinfección con Babesia spp. Para ello se analizaron 60 extracciones de ADN obtenidas de muestras de sangre de perros de Galicia con sospecha clínica de infección por hemopatógenos mediante PCR convencional para la detección de hemoplasmas. Posteriormente, las muestras positivas se secuenciaron y se estudió su variabilidad genética mediante la construcción de un árbol filogenético. A continuación, con los datos recogidos de cada animal (edad, sexo, aptitud, infección por Babesia spp., hematocrito), se realizó un análisis estadístico para valorar los posibles factores de riesgo y el efecto de la infección sobre el hematocrito en infecciones únicas o mixtas con Babesia spp. Un total de 14 muestras (23,3%) resultaron positivas, y las especies encontradas fueron: “Ca. M. haematoparvum” (20%) y M. haemocanis (3%). El análisis estadístico no mostró una asociación significativa entre la edad, el sexo y la coinfección con Babesia spp. respecto a la positividad por hemoplasmas; sin embargo, la aptitud de caza se asoció significativamente con una mayor tasa de infección. Además, se determinó que los micoplasmas hemotrópicos, solos o en coinfección con Babesia spp., no muestran un efecto significativo sobre el valor del hematocrito. Este trabajo representa el primer estudio molecular de la ocurrencia de estas infecciones en perros de Galicia, y en él se detectaron las dos especies de micoplasmas hemotrópicos consideradas propias de la especie canina. Además, el análisis estadístico refuerza la idea de que la transmisión de estos patógenos se produce a través de vectores, ya que los perros de hábitat rural, como los de caza, presentaron una mayor tasa de infección. Sin embargo, los micoplasmas hemotrópicos no parecen tener una gran capacidad patógena, ya que su presencia no se asoció con un menor valor de hematocrito, tanto en infecciones únicas como en coinfecciones con Babesia spp.[GAL] Os micoplasmas hemotrópicos (hemoplasmas) son bacterias epicelulares obrigadas que infectan os glóbulos vermellos dunha ampla variedade de mamíferos, podendo causar anemia hemolítica de gravidade variable. No can descríbense dúas especies: Mycoplasma haemocanis e “Candidatus Mycoplasma haematoparvum”. Neles, a infección adoita ter un curso crónico asintomático, pero a esplenectomía e a inmunosupresión favorecen o desenvolvemento dunha infección aguda manifesta. Os obxectivos deste traballo foron determinar a presenza de micoplasmas hemotrópicos en cans con sospeita clínica de infección por hemopatóxenos, identificar as especies detectadas molecularmente e determinar se certos factores inflúen na presenza destes patóxenos. Ademais, avaliouse o efecto dos micoplasmas hemotrópicos sobre o valor do hematocrito en infeccións únicas e en coinfección con Babesia spp. Para iso analizáronse 60 extraccións de ADN obtidas de mostras de sangue de cans de Galicia con sospeita clínica de infección por hemopatóxenos mediante PCR convencional para a detección de hemoplasmas. Posteriormente, as mostras positivas secuenciáronse e estudouse a súa variabilidade xenética mediante a construción dunha árbore filoxenética. A continuación, cos datos recollidos de cada animal (idade, sexo, aptitude, infección por Babesia spp., hematocrito), realizouse unha análise estatística para valorar os posibles factores de risco e o efecto da infección sobre o hematocrito en infeccións únicas ou mixtas con Babesia spp. Un total de 14 mostras (23,3%) resultaron positivas, e as especies atopadas foron: “Ca. M. haematoparvum” (20%) e M. haemocanis (3%). A análise estatística non mostrou unha asociación significativa entre a idade, o sexo e a coinfección con Babesia spp. respecto á positividade por hemoplasmas; con todo, a aptitude de caza asociouse significativamente cunha maior taxa de infección. Ademais, determinouse que os micoplasmas hemotrópicos, sós ou en coinfección con Babesia spp., non mostran un efecto significativo sobre o valor do hematocrito. Este traballo representa o primeiro estudo molecular da ocorrencia destas infeccións en cans de Galicia, e nel detectáronse as dúas especies de micoplasmas hemotrópicos consideradas propias da especie canina. Ademais, a análise estatística reforza a idea de que a transmisión destes patóxenos prodúcese a través de vectores, xa que os cans de hábitat rural, como os de caza, presentaron unha maior taxa de infección. Con todo, os micoplasmas hemotrópicos non parecen ter unha gran capacidade patóxena, xa que a súa presenza non se asociou cun menor valor de hematocrito, tanto en infeccións únicas como en coinfecciones con Babesia spp.[ENG] Hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas) are obligate epicellular bacteria that infect the red blood cells of a wide variety of mammals, potentially causing hemolytic anemia of varying severity. In dogs, two species are described: Mycoplasma haemocanis and “Candidatus Mycoplasma haematoparvum.” In these animals, the infection usually has a chronic asymptomatic course, but splenectomy and immunosuppression favor the development of an acute manifest infection. The objectives of this study were to determine the presence of hemotropic mycoplasmas in dogs with clinical suspicion of hemopathogen infection, identify the molecularly detected species, and determine if certain factors influence the presence of these pathogens. Additionally, the effect of hemotropic mycoplasmas on hematocrit levels was evaluated in single infections and coinfections with Babesia spp. To this end, 60 DNA extractions obtained from blood samples of dogs from Galicia with clinical suspicion of hemopathogen infection were analyzed using conventional PCR for the detection of hemoplasmas. Subsequently, positive samples were sequenced, and their genetic variability was studied by constructing a phylogenetic tree. Then, with the data collected from each animal (age, sex, aptitude, infection with Babesia spp., hematocrit), a statistical analysis was performed to assess possible risk factors and the effect of the infection on hematocrit in single or mixed infections with Babesia spp. A total of 14 samples (23.3%) tested positive, and the species found were: “Ca. M. haematoparvum” (20%) and M. haemocanis (3%). Statistical analysis did not show a significant association between age, sex, and coinfection with Babesia spp. concerning hemoplasma positivity; however, hunting aptitude was significantly associated with a higher infection rate. Furthermore, it was determined that hemotropic mycoplasmas, alone or in coinfection with Babesia spp., do not show a significant effect on hematocrit levels. This study represents the first molecular investigation of the occurrence of these infections in dogs from Galicia, detecting the two species of hemotropic mycoplasmas considered characteristic of the canine species. Additionally, the statistical analysis reinforces the idea that the transmission of these pathogens occurs through vectors, as rural habitat dogs, such as hunting dogs, showed a higher infection rate. However, hemotropic mycoplasmas do not seem to have a high pathogenic capacity, as their presence was not associated with lower hematocrit levels, both in single infections and coinfections with Babesia spp.