Desarrollo de un método analítico para la determinación de nicotina y sus metabolitos en muestras materno-fetales

Abstract

El consumo, tanto activo como pasivo, de tabaco por parte de las mujeres gestantes representa un importante problema de salud en nuestro país. Las matrices biológicas empleadas para el estudio de la exposición a sustancias intra-útero en toxicología son variadas e incluyen el pelo (considerado el “gold standard”), el meconio, y más recientemente, la placenta y el cordón umbilical. Estas dos últimas constituyen muestras materno-fetales alternativas con un gran potencial ya que son tejidos en estrecho contacto con el feto, son considerados productos de “desecho”, y además están disponibles en grandes cantidades y pueden obtenerse en el momento del parto mediante métodos no invasivos. En el presente trabajo se ha desarrollado y validado un método para la detección de nicotina, cotinina e hidroxicotinina en placenta y cordón umbilical. El análisis se realizó mediante LC-MS/MS, utilizándose para ello una columna de interacción hidrofílica (Atlantis® HILIC Silica) y un gradiente con Formiato amónico 2mM+AF 0,1% y ACN+0,1% AF, en un tiempo total de 15 min. Para la detección se ha utilizado un triple cuadrupolo con interfase ESI+. El método ha sido validado satisfactoriamente en ambas matrices para los parámetros de: linealidad, exactitud, imprecisión, límite de detección y límite de cuantificación, selectividad, efecto matriz, rendimiento de la extracción, eficacia total del proceso y estabilidad. Finalmente, el método fue aplicado a muestras procedentes de 32 partos, y los resultados fueron comparados con la entrevista materna y los resultados analíticos obtenidos en el pelo materno