González Villa, TomásMiguel Bouzas, Mª Trinidad deRodríguez Rama, José Luis2022-06-012023-04-222022http://hdl.handle.net/10347/28759En el presente trabajo se aborda la búsqueda y caracterización de la toxina presente en el veneno de E. vipera, persiguiendo obtener su secuencia codificante y producirla de forma heteróloga en tres organismos comúnmente utilizados para este fin: E. coli, P. pastoris y N. tabacum. Simultáneamente se desarrollaron plantas de N. tabacum con su ruta de glicosilación modificada, con el fin de que produzcan glicanos parcialmente humanizados. Los trabajos se centran en la generación de construcciones capaces de silenciar o reducir la expresión de los genes β1,2-xylosyltransferasa y α1,3- fucosyltransferasa, empleando para ello sistemas de ARN interferentes (ARNi), así como la inserción del gen β1,4-galactosiltransferasa humano para la producción de proteínas con potencial interés de uso en humanos, como podría ser la toxina de E. vipera.spaAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/Echiichthys viperaEscherichia coliPichia pastorisNicotiana tabacumglicosilacióntoxinacanales de membranaARN interferenteMaterias::Investigación::24 Ciencias de la vida::2409 Genética::240902 Ingeniería genéticaMaterias::Investigación::24 Ciencias de la vida::2415 Biología molecular::241501 Biología molecular de microorganismosMaterias::Investigación::24 Ciencias de la vida::2415 Biología molecular::241502 Biología molecular de plantasObtención, clonación y expresión de la toxina de Echiichthys vipera en Escherichia coli, Pichia pastoris y Nicotiana tabacum con la ruta de glicosilación humanizadadoctoral thesisopen access