RT Dissertation/Thesis
T1 Sensores luminiscentes de proteínas implicadas en cáncer
A1 Pazos Chantrero, Elena
K1 Sensores
K1 Luminiscencia
K1 Péptidos
K1 Proteínas
K1 Cáncer
AB El desarrollo de sensores selectivos y eficientes representa uno de los mayores retos de lasinvestigaciones actuales en el campo de la biomedicina. Nuestro trabajo se ha centrado en eldesarrollo de sensores luminiscentes para estudiar procesos de interacción proteína-proteína derelevancia biológica y más concretamente, para la detección selectiva de proteínas implicadas enel ciclo celular y factores de transcripción oncogénicos.1. Sensores de proteína quinasa C. La fosforilación de proteínas reguladoras es la modificaciónmás frecuentemente para modular los mecanismos celulares. Las quinasas que catalizan latransferencia de fosfato están implicadas prácticamente en cada aspecto del funcionamientocelular. Un claro ejemplo es la proteína quinasa C que juega un papel importante en laregulación del ciclo celular y por este motivo existe un gran interés en el desarrollo de sensoresespecíficos de esta proteína.Se han desarrollado varios péptidos que actúan como sensores de la proteína quinasa C queincorporan en su secuencia un complejo quelatante de lantánidos coordinativamente insaturadoy un residuo de Trp que permite la emisión del metal por transferencia de energíaintramolecular. Se ha demostrado que la señal de luminiscencia de estos péptidos es sensible asu estado de fosforilación y se ha estudiado el mecanismo de esa variación.2. Sensores de ciclina A. El ciclo celular en células eucariotas está regulado por varioscomplejos de quinasas formados por la asociación de una unidad de quinasa (CDK) con unaunidad reguladora de ciclina. Se ha encontrado una gran correlación entre la desregulación deestos complejos y la patología del cáncer. Por ello es interesante el desarrollo de sensores deciclina que puedan usarse en el estudio de mecanismos implicados en el control del ciclocelular y que sirvan para la identificación de nuevos inhibidores con posibles aplicacionesfarmacológicas.Se han diseñado dos tipos de sensores luminiscentes para ciclina A. Por un lado se hanpreparado sensores luminiscentes basados en la sensibilización intermolecular de complejos peptídicos deTb3+ que se unen específicamente a ciclina A y que han demostrado buena afinidad yextraordinaria selectividad. Este trabajo constituye la primera demostración del mecanismo desensibilización intermolecular como base para un sensor biomolecular. Por otra parte se hansintetizado péptidos fluorescentes sensibles a la polaridad que aumentan su emisión selectivamente enpresencia de ciclina A, con los que se han puesto a punto ensayos de competición para laidentificación de posibles inhibidores de esta proteína.3. Sensores de cremalleras de leucinas y del factor de transcripción c-Jun. La expresión genética esun proceso perfectamente regulado y dicha regulación se produce fundamentalmente en laetapa de la transcripción por la acción de proteínas especializadas llamadas factores de transcripcióncuya alteración puede originar un gran número de enfermedades como el cáncer. Una de lasproteínas más frecuentemente implicada en la aparición y desarrollo de cánceres humanos es elfactor de transcripción c-Jun, lo que lo convierte en una diana fundamental en el desarrollo deestrategias terapéuticas anticáncer y de nuestros estudios en nuevas estrategias de detección.Se han diseñado sensores basados en cremalleras de leucinas modificadas que incluyen unresiduo de Trp dador y un complejo DOTA[Tb3+] aceptor cuya separación, y por lo tanto laeficiencia en la transferencia de energía y en la señal luminiscente, depende del estado deasociación del péptido. De esta manera se puede
YR 2012
FD 2012-04-02
LK http://hdl.handle.net/10347/4041
UL http://hdl.handle.net/10347/4041
LA spa
DS Minerva
RD 24 abr 2026