Expresión inmunohistoquímica mediante doble coloración p16/ki67 para determinar virus del papiloma humano (VPH) en lesiones orales

Abstract

Introducción: El carcinoma oral de células escamosas (COCE) es el tumor maligno más prevalente en la cavidad oral y cuya asociación con el virus del papiloma humano (VPH) es importante. La presencia del VPH se ha asociado con liquen plano oral, displasia epitelial y leucoplasia oral. Se ha observado que las infecciones oncogénicas provocadas por VPH se relacionan con la expresión de moléculas celulares: p16 y Ki67. Se ha propuesto que estas moléculas puedan usarse como biomarcadores de lesión o de progresión. Hemos probado la presencia de ADN del VPH en biopsias de leucoplasias orales para evaluar su papel en el desarrollo del cáncer oral para estudiar las ventajas que pueden mostrar p16 y Ki67 a la hora de evaluar un diagnóstico. Objetivos: Asociar la expresividad de p16 y Ki67 con la presencia del VPH y asociar la expresión de p16 y Ki67 con variables clínicas específicas y el desarrollo de VPH. Material y métodos: Se recolectaron de manera retrospectiva aquellos datos con diagnóstico de leucoplasia. Para determinar la presencia de p16 y Ki67 se llevó a cabo la inmunohistoquímica en muestras embebidas en parafina. La presencia del ADN del VPH fue probada usando el sistema CLART® HPV 2. Estadísticamente se analizó mediante el programa SPSS v.24.0 comparando medias y frecuencias con Chi-cuadrado, Krusal-Wallis y ANOVA y generando curvas de supervivencia mediante Kaplan-Meier comparando los factores con el estadístico log rank. Resultados: Se evaluaron 33 muestras de 28 pacientes, en base a las cuales no se encontró relación estadísticamente significativa entre la expresividad de los marcadores biológicos p16 y Ki67 con la presencia del VPH a nivel de la cavidad oral y tampoco entre la expresividad de p16 y Ki67 respecto a características clínicas específicas. Conclusiones: No se puede afirmar que exista una relación clara y directa entre los marcadores biológicos p16 y Ki67 y la presencia de VPH oral ni su correlación con características clínicas específicas.

Introduction: Oral squamous cell carcinoma (COCE) is the most prevalent malignant tumor in the oral cavity and whose association with the human papillomavirus (HPV) is important. The presence of HPV has been associated with oral lichen planus, epithelial dysplasia, and oral leukoplakia. Oncogenic infections caused by HPV have been found to be related to the expression of cellular molecules: p16 and Ki67. It has been proposed that these molecules will be used as progression injury biomarkers. We have tested the presence of HPV DNA in oral leukoplakia biopsies to evaluate its role in the development of oral cancer to study the advantages that p16 and Ki67 can show when evaluating a diagnosis. Objectives: To associate the expressivity of p16 and Ki67 with the presence of HPV and associate the expression of p16 and Ki67 with specific variables and the development of HPV. Material and methods: Data with a diagnosis of leukoplakia were collected retrospectively. To determine the presence of p16 and Ki67, immunohistochemistry was carried out on paraffin-embedded samples. The presence of HPV DNA was tested using the CLART® HPV 2 system. Statistically, it was analyzed using the SPSS v.24.0 program, comparing means and frequencies with Chi-square, Krusal-Wallis and ANOVA and generating survival curves using Kaplan-Meier comparing the factors with the log rank statistic. Results: 33 samples from 28 patients were evaluated, on the basis of which no statistically significant relationship was found between the expressivity of the biological markers p16 and Ki67 with the presence of HPV at the level of the oral cavity and neither between the expressivity of p16 and Ki67 regarding specific clinical characteristics. Conclusions: It cannot be said that there is a clear and direct relationship between the biological markers p16 and Ki67 and the presence of oral HPV or its correlation with specific clinical characteristics

Introdución: O carcinoma oral de células escamosas (COCE) é o tumor maligno máis prevalente na cavidade oral e cuxa asociación co virus do papiloma humano (VPH) é importante. A presenza do VPH asociouse co liquen plano oral, displasia epitelial e leucoplasia oral. Observouse que as infeccións oncogéxicas provocadas por VPH se relacionan coa expresión de moléculas celulares: p16 e Ki67. Propúxose que estas moléculas poidan usarse como biomarcadores de lesión ou de progresión. Probamos a presencia de ADN do VPH en biopsias de leucoplasias orais para evaluar o seu papel no desenvolvemento do cáncer oral para estudiar as vantaxes que poden mostrar p16 e Ki67 á hora de avaliar un diagnóstico. Obxectivos: Asociar a expresividade de p16 e Ki67 coa presencia do VPH e asociar a expresión de p16 e Ki67 con variables clínicas específicas e o desenvolvemento de VPH. Material e métodos: Recolectáronse de maneira retrospectiva aqueles datos con diagnóstico de leucoplasia. Para determinar a presencia de p16 e Ki67 levouse a cabo a inmunohistoquímica en mostras embebidas en parafina. A presenza do ADN do VPH foi probada usando o sistema CLART® HPV 2. Estadísticamente analizose mediante o programa SPSS v.24.0 comparando medias e frecuencias con Chi-cuadrado, Krusal-Wallis e ANOVA e xerando curvas de supervivencia mediante Kaplan-Meier comparando os factores co estadístico log rank. Resultados: Avaliáronse 33 mostras de 28 pacientes, en base ás cales non se atopou relación estadísticamente significativa entre a expresividade dos marcadores biolóxicos p16 e Ki67 coa presencia do VPH a nivel da cavidade oral e tampouco entre a expresividade de p16 e Ki67 respecto a características clínicas específicas. Conclusións: Non se pode afirmar que exista unha relación clara e directa entre os marcadores biolóxicos p16 e Ki67 e a presenza de VPH oral nin a súa correlación con características clínicas específicas