Aplicación de técnicas de cultivo in vitro en la propagación del aliso con vistas a su conservación

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Se ha desarrollado un protocolo eficaz para el establecimiento in vitro mediante la proliferación de yemas axilares de material procedente de genotipos adultos de aliso. Las estaquillas, obtenidas de árboles de 20-30 años, fueron “forzadas” a brotar y los brotes se cultivaron en medio Woody Plant Medium (WPM) (Lloyd y McCown, 1980) con 2 mg/l de benciladenina (BA) y 0,5 mg/l de ácido indol-3-acético (AIA). El mantenimiento de los cultivos se realiza mediante subcultivos secuenciales cada 9 semanas en el mismo medio mineral adicionado con 0,1 mg/l de BA y 0,5 mg/l de AIA. Transferencias a medio fresco cada 3 semanas, la inclusión de la zeatina (Z) en el último ciclo y la sustitución de sacarosa 3% por glucosa 2%, mejoran las tasas de multiplicación y la calidad de los brotes. Los brotes obtenidos en la etapa de multiplicación fueron enraizados con facilidad incluso en el tratamiento sin auxina (84,0%), aunque la presencia de ácido indol-3-butírico (AIB) en el medio incrementó los porcentajes de enraizamiento, especialmente cuando la glucosa 2% (93,4%) fue incorporada al medio en vez de sacarosa 3% (86,9%). Las plantas enraizadas fueron aclimatadas en una cámara de crecimiento durante 6 semanas, y posteriormente transferidas al invernadero.

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