Ensayos de toxicidad de nanocápsulas cargadas con fármacos inmunoestimulantes en Danio rerio

Abstract

El presente trabajo de fin de grado tiene como objetivo la evaluación in vivo de la toxicidad de dos fármacos inmunoestimulantes, Resiquimod (R848) y Poly I:C, en embriones de Danio rerio (pez cebra). Investigamos el efecto de estos fármacos en su forma libre, y también cargados en el interior de nanocápsulas poliméricas de polímero 1, recubiertas o no con polímero 2. Ambos fármacos son capaces de inducir la reprogramación de macrófagos asociados a tumores (TAMs), desde un fenotipo M2 con propiedades protumorales a un fenotipo M1 con funciones antitumorales, mediante la activación de los receptores de tipo Toll (TLR) 7 y 8 en el caso de Resiquimod, y TLR3 en el caso de Poly I:C. Evaluamos la toxicidad de estos fármacos a 5 dosis diferentes (0,01mg/ml, 0,03 mg/ml, 0,06 mg/ml, 0,12 mg/ml y 0,25 mg/ml) mediante inyección intravenosa en peces cebra para establecer la dosis máxima inyectable que no causa mortalidad. En la segunda serie de experimentos, aumentamos el número de embriones por condición e inyectamos todos los grupos a una concentración de 0,25 mg/ml. A partir de los datos obtenidos, analizamos la toxicidad para cada grupo a las 24 horas post-inyección (hpi), a las 48hpi y a las 144hpi, y calculamos las curvas de supervivencia correspondientes a cada grupo. De acuerdo con estos análisis, podemos concluir que ninguno de los tratamientos investigados causa una mortalidad significativa en comparación con el grupo control.