Optimización de metodologías en cromatografía líquida - espectrometría de masas en tándem para la determinación de etilglucurónido en cabello

Abstract

El alcohol es uno de los causantes de problemas en el ámbito doméstico, legal, laboral y económico por lo que estudio de los marcadores directos de alcoholismo se ha convertido en una tarea de vital importancia. Es en este ámbito donde destaca el análisis del etilglucurónido en cabello (hEtG), una matriz que ha ganado un gran interés en los últimos años gracias a la gran ventana de detección que ofrece. La LC-MS/MS se ha impuesto actualmente como la técnica de preferencia para el análisis del hEtG donde la HILIC (Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography) tiene un papel fundamental. En este Trabajo de Fin de Grado se ha estudiado el efecto de la composición, concentración y pH de la fase móvil, así como el efecto de la temperatura de la columna junto a distintos programas cromatográficos, consiguiendo así optimizar un método cromatográfico que emplea HILIC para la determinación de hEtG con un LOD 2,64 pg/mg, cumpliendo con los requisitos de la Society of Hair Testing (SoHT). Además, se ha evaluado el impacto que tienen distintos protocolos y cartuchos SPE en la señal analíticaAlcohol is a cause of problems in domestic, legal, workplace and economic spheres, so investigating direct alcohol markers is an important task. In this area, analysis of hair ethyl glucuronide (hEtG) is of particular interest, as this matrix has a large detection window and has gained interest in recent years. LC-MS/MS is now the preferred technique for EtG analysis, with HILIC (hydrophilic interaction liquid chromatography) playing a fundamental role. The current Degree Project has studied the effects of the composition, concentration and pH of the mobile phase, as well as the effect of column temperature, in conjunction with different chromatographic methods. Thus, an HILIC-based chromatographic method for determining hEtG was optimised, achieving a LOQ of 2,64 pg/mg, meeting the Society of Hair Testing (SoHT) requirements. Additionally, the impact of various SPE protocols and cartridges on the analytical signal was evaluated