IC-Tagging: plataforma universal para la producción de microesferas proteicas para aplicaciones biotecnológicas

Abstract

La metodología del IC-Tagging se basa en el uso de una proteína, muNS-Mi, que por sí sola es capaz de formar estructuras esféricas en las células (microesferas, MS) que son fácilmente purificables. Además podemos etiquetar cualquier proteína con un tag denominado IC con el cual provocamos que se modifique la localización de forma que las proteínas etiquetadas quedan incluidas en las microesferas. En este estudio se utilizó este sistema para el desarrollo de un sensor de retrotranslocación de proteínas del retículo endoplasmático (RE). Para esto adaptamos el reensamblaje de fragmentos de EGFP al sistema IC-Tagging donde los resultados obtenidos mostraron que sería un sensor poco eficaz. También adaptamos el sistema al interior del retículo endoplasmático para intentar el desarrollo de vacunas contra virus envueltos, produciendo y purificando MS formadas en el interior del RE cargadas con glicoproteínas. Para intentar expresar proteínas difíciles, adaptamos el sistema para expresar y purificar proteínas en bacterias. Por último intentamos resolver la estructura de la proteína muNS-Mi y descubrir como las proteínas etiquetadas se distribuyen en las mismas.